實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)

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細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室設(shè)備配置及用途

作者: 細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室設(shè)備發(fā)表時(shí)間:2017-08-25 08:55:42瀏覽量:6294

目前絕大部分細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室使用超凈工作臺實(shí)現(xiàn)無菌操作,具有操作簡單、安裝方便、占用空間小且凈化效果很好。安徽人和凈化為您介紹兩種主要超凈工作臺-側(cè)流式(垂直式)和外流式(水平層流式)。工作原理一般是將室內(nèi)空氣經(jīng)粗過濾器初濾,由離心風(fēng)機(jī)壓入靜壓箱,再經(jīng)高效空氣過濾器精濾,由此送出的潔凈氣流以一定的均勻的斷面風(fēng)速通過無菌區(qū),從...
文本標(biāo)簽:細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室設(shè)備
1. 超凈工作臺
實(shí)驗(yàn)室設(shè)備

   目前絕大部分細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室使用超凈工作臺實(shí)現(xiàn)無菌操作,具有操作簡單、安裝方便、占用空間小且凈化效果很好。安徽人和凈化為您介紹兩種主要超凈工作臺-側(cè)流式(垂直式)和外流式(水平層流式)。工作原理一般是將室內(nèi)空氣經(jīng)粗過濾器初濾,由離心風(fēng)機(jī)壓入靜壓箱,再經(jīng)高效空氣過濾器精濾,由此送出的潔凈氣流以一定的均勻的斷面風(fēng)速通過無菌區(qū),從而形成無塵無菌的高潔凈度工作環(huán)境。

 ?。?) 側(cè)流式工作臺:空氣凈化后的氣流由左或右側(cè)通過工作臺面流向?qū)?cè),也有從上向下或從下向上流向?qū)?cè),形成氣流屏障保持工作區(qū)無菌,工作臺結(jié)構(gòu)為封閉式;

  (2) 外流式工作臺:凈化后的空氣面向操作者流動(dòng),因而外方氣流不致混入操作,工作臺結(jié)構(gòu)為開放式,但進(jìn)行有害物質(zhì)實(shí)驗(yàn)操作對操作者不利。 超凈工作臺應(yīng)需要定期請有關(guān)部門檢查潔凈度,符合要求的超凈工作臺其潔凈度應(yīng)達(dá)到100級,用塵埃粒子計(jì)數(shù)儀檢測粒徑≤5μm的塵埃粒子數(shù)量不應(yīng)超過3.5個(gè)/L;空氣流量應(yīng)控制在0.75-1.0m3/s;細(xì)菌菌落數(shù)平均<1個(gè),根據(jù)無菌狀況必要時(shí)需要置換過濾器。

2. 顯微鏡

  倒置式顯微鏡是細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室日常工作常規(guī)必備設(shè)備,主要用于日常了解細(xì)胞的生長情況并觀察有無污染發(fā)生。如資金允許,建議選用配置有照相系統(tǒng)的高品質(zhì)相差顯微鏡、解剖顯微鏡、熒光顯微鏡、錄像系統(tǒng)或縮時(shí)電影拍攝裝置等,可隨時(shí)拍攝并記錄細(xì)胞生長情況。

3. 培養(yǎng)箱

   體外培養(yǎng)的細(xì)胞和體內(nèi)細(xì)胞一樣,需要在恒定的溫度下生存,一般最適生長溫度為37℃,溫差變化不應(yīng)超過±0.5℃。溫度升高2℃時(shí),變不利于細(xì)胞生存,溫度達(dá)到40℃以上細(xì)胞將很快死亡。因此,可精確控溫的恒溫培養(yǎng)箱、CO2培養(yǎng)箱是最佳選擇。

  (1) 恒溫培養(yǎng)箱:應(yīng)選隔水式或晶體管式自控溫培養(yǎng)箱,此類培養(yǎng)箱靈敏度高,溫度控制較穩(wěn)定。一般的恒溫培養(yǎng)箱價(jià)格較便宜,其缺點(diǎn)是只宜于作密閉式培養(yǎng)。

 ?。?) CO2培養(yǎng)箱:目前多數(shù)的細(xì)胞培養(yǎng)室已廣泛使用。CO2培養(yǎng)箱的優(yōu)點(diǎn)是能夠提供進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)所需要的一定量的CO2(常用濃度為5%),易于穩(wěn)定培養(yǎng)液pH,適用于開放或半開放培養(yǎng)。使用培養(yǎng)瓶時(shí),為使培養(yǎng)瓶內(nèi)與外界保持通氣狀態(tài),可將瓶蓋略微旋松,為避免細(xì)胞被污染,使用這種培養(yǎng)方式時(shí),培養(yǎng)箱內(nèi)空氣必須保持清潔,需定期用紫外線照射或酒精消毒,同時(shí)培養(yǎng)箱內(nèi)應(yīng)放置盛有無菌蒸餾水的水槽,防止培養(yǎng)液蒸發(fā),保持箱內(nèi)相對濕度在100%。

  (3) 細(xì)胞培養(yǎng)耗材:培養(yǎng)細(xì)胞的器皿可用培養(yǎng)皿、培養(yǎng)板或培養(yǎng)瓶。

4. 烘箱(干燥箱)

  用于細(xì)胞培養(yǎng)的一些器械、器皿必須烘干后才能使用,玻璃器皿等須干熱消毒。干熱消毒時(shí),烘箱內(nèi)溫度一般要達(dá)到160℃以上,通常使用鼓風(fēng)式烘箱。其優(yōu)點(diǎn)是溫度均勻、效果較好,缺點(diǎn)是升溫過程較慢。升溫時(shí)不能先升溫后鼓風(fēng)而應(yīng)鼓風(fēng)與升溫同時(shí)開始,至100℃時(shí),停止鼓風(fēng)。需注意避免包裹器皿的紙或棉花燒焦,燒焦的碎屑可影響細(xì)胞的生長。消毒后不能立即打開箱門,以免驟冷導(dǎo)致玻璃器皿破裂,應(yīng)等溫度自然下降至100℃以下后可開門。

5. 水純化裝置

  細(xì)胞培養(yǎng)對水的質(zhì)量要求較高,細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)液體的配制用水以及清洗細(xì)胞培養(yǎng)器皿用水都必須事先經(jīng)過嚴(yán)格的純化處理。目前有多種純化方法相結(jié)合,可使普通水純化為純水和超純水的純水裝置使用非常靈活方便,可掛壁式、臺式、可配儲水箱、也可直接用分液槍、還可根據(jù)各類實(shí)驗(yàn)用水要求選擇配置殺菌功能,有效去除DNA酶、RNA酶、蛋白酶等,更有可有效去除掉熱源、內(nèi)毒素的超濾型純水裝置。

6. 冰箱

  細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室必備設(shè)備,應(yīng)專用,不得存放易揮發(fā)、易燃燒等對細(xì)胞有害的物質(zhì),且應(yīng)保持清潔。一般包括普通冰箱、低溫冰箱和超低溫冰箱。

  普通冰箱:儲存培養(yǎng)液、生理鹽水、Hanks液試劑等培養(yǎng)用的物品,可短期保存組織樣本。

  -20℃低溫冰箱、超低溫冰箱:用于儲存需要冷凍以保持生物活性以及需長時(shí)期存放的制劑,如酶、血清等。

7. 細(xì)胞冷凍儲存器

  儲存器常用的液氮容器,根據(jù)使用需要分為不同類型和規(guī)格。選擇液氮容器時(shí)需要考慮三個(gè)因素:容積大小、取放使用方便、液氮揮發(fā)量。液氮容器的大小一般在25-500L,可以儲存1ml的凍存管250-15000個(gè)左右。液氮溫度最低文帝可達(dá)-196℃,使用時(shí)應(yīng)注意避免凍傷。由于液氮易揮發(fā),需注意觀察剩余液氮量,及時(shí)補(bǔ)充,避免液氮不足使細(xì)胞受損或死亡。目前有許多智能型細(xì)胞冷凍儲存器可供選擇,可配置有電子控制器的液氮儲存器,實(shí)現(xiàn)凍存自動(dòng)化;并可監(jiān)測液氮水平和樣品溫度,確保樣品溫度始終處于設(shè)定溫度點(diǎn);可配置報(bào)警系統(tǒng),設(shè)置液氮液面、溫度、電池、電壓、電源等失常情況下報(bào)警;同時(shí)具備熱氣體旁路系統(tǒng),防止高于-130℃的暖空氣進(jìn)入液氮罐,從而更有效地保護(hù)樣品,防止容器內(nèi)升溫。另外,可選擇液氮供應(yīng)罐通過連接管給儲存罐補(bǔ)充液氮,保證樣品安全。

8. 離心機(jī)

  細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),通常使用離心機(jī)制備細(xì)胞懸液、調(diào)整細(xì)胞密度、洗滌和收集細(xì)胞。一般常規(guī)配置4000rpm臺式離心機(jī);若要做細(xì)胞沉降,需要使用80-100G離心力,因?yàn)殡x心力過大會損傷細(xì)胞。根據(jù)不同要求,有大容量、可調(diào)溫度離心機(jī)、高速離心機(jī)和低溫冷凍離心機(jī)等更多功能離心機(jī)可選擇。

9. 天平

  常用的有精密天平和分析天平。 分析天平的精確度一般為0.1mg、0.01mg和0.001mg。一般根據(jù)取樣量量和精度要求選擇合適的天平:取樣量大于100mg宜選用精確度0.1mg的天平;取樣量100-10mg,選用精確度0.01mg的天平;取樣量10mg宜選用精確度0.001mg的天平。天平需要定期校準(zhǔn),可選擇有自動(dòng)校準(zhǔn)功能的天平,方便維護(hù)。天平使用需要注意清潔,避免腐蝕性粉末、液體直接接觸稱量臺。


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